因此，尋找和開發(fā)食品級安全健康的促消化飲料可能是改善上述疾病的重要環(huán)節(jié)。雪梨味道甘甜且性偏寒，其中含有豐富的糖類與蘋果酸，此外還富含維生素B1、維生素B、維生素C以及胡蘿卜素等成分。研究表明，梨具有清熱生津、養(yǎng)血生肌、止咳祛痰的生理功效，是一種健康的食藥兩用水果。南果梨是遼寧省的特產水果，后熟后香氣濃郁，果肉呈軟溶質地且汁水充足，含有大量微量元素，有抗氧化、防治心血管疾病等重要功效，被譽為“梨中之王。隨著消費者需求的增加，梨果加工業(yè)正逐步向產品多元化與高端化方向推進。
 

陳皮中的揮發(fā)油具有祛痰鎮(zhèn)咳、行氣平喘等功效，對胃腸道有溫和的刺激作用，可促進消化液分泌。山楂具有健脾開胃、消食化滯等功能。玫瑰茄具有抗腫瘤、抗氧化、降血脂、保護肝細胞等作用。本文通過單因素試驗與正交試驗優(yōu)化陳皮山楂玫瑰茄復合梨湯飲料配方和加工工藝，以感官評分為主要評價指標，結合總酚含量、總黃酮含量及抗氧化能力測定結果，確定最佳工藝參數。同時運用網絡藥理學的方法，探究其有效成分對FD網絡的作用機制，進而預測出復合梨湯飲料中促消化的活性化合物以及對應的靶點蛋白，以期為FD的輔助調理開發(fā)一款營養(yǎng)豐富、口感優(yōu)異的梨湯飲料。

一、材料與方法

01材料與試劑
雪梨、南果梨:市售;冰糖:云南滇鵬糖業(yè)有限公司;陳皮、山楂、玫瑰茄:健之佳醫(yī)藥連鎖集團股份有限公司;檸檬酸(食品級):石藥集團有限公司;沒食子酸、蘆丁(純度均>98%)、福林酚試劑、碳酸鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-di-pheny+2-picryhydrazyl,DPPH)、水楊酸、無水乙醇、三氯化鐵、鐵氰化鉀、三氯乙酸、硫酸亞鐵(均為分析純):天津市天力化學試劑有限公司。

02感官評價
由20名經培訓的專業(yè)飲料品評員(10男10女)組成評價小組，感官評價小組根據設計的感官評價標準對CPB-THR進行感官評價，總分為100，結果取平均值。CPB-THR感官評分標準如表2所示。

二、結果與分析

01單因素試驗結果

單因素試驗結果見圖1。

由圖1A可知，當燉煮時間在25~35 min時，CPB-THR的感官評分較高(P<0.05)。此時飲料具有協(xié)調的復合香氣和適口滋味，消費者接受度高。其中，燉煮時間為30 min時感官評分達到最大值(74.40+4.32)(P<0.05)。當燉煮時間繼續(xù)延長時，感官評分呈急劇下降趨勢(P<0.05)。由此可見，較短的燉煮時間難以充分激發(fā)原料中的風味物質，這使得CPB-THR的口感變得寡淡，導致感官評分較低，消費者接受度較低。但是燉煮時間過長會帶來明顯的風味缺陷，掩蓋了原料本身的天然香甜味道，對感官評分產生負面影響。綜合考慮，本研究選取燉煮時間25、30、35 min進行后續(xù)正交試驗。由圖18可知，陳皮添加量對CPB-THR的可接受性存在較顯著的影響。當陳皮添加量大于2.0%時，感官評分明顯下降，這可能與陳皮中含有的橘皮苷、川陳皮素等苦味物質隨著陳皮添加量的增多在飲料中不斷累積有關。綜合考慮，本研究選取陳皮添加量1.0%、2.0%、3.0%進行后續(xù)正交試驗。

由圖1C可知，當山楂添加量1.0%~1.4%時候均有較高的CPB-THR感官評分(P<0.05)，在添加量為1.0%時候到達最大值(75.2+4.4)。在添加量大于1.4%時感官評分急劇降低(P<0.05)，可能由于山楂添加量的增加，山楂中檸檬酸、蘋果酸等酸性成分大量富集，導致飲料出現(xiàn)明顯澀味。綜合考慮，選取山楂添加量0.6%、1.0%、1.4%進行后續(xù)正交試驗。
 

由圖1D可知，在玫瑰茄添加量為0.6%時CPB-THR的感官評分出現(xiàn)峰值，這可能與玫瑰茄中含有的檸檬酸、蘋果酸等有機酸隨著玫瑰茄添加量的增加在飲料中不斷累積有關。綜合考慮，本研究選取玫瑰茄添加量0.2%、0.6%和1.0%進行后續(xù)正交試驗。

02CPB‐THR配方正交試驗結果與分析
正交試驗結果如表3所示，主體間效應檢驗見表4。

由表3可知，CPB-THR的感官評分受多種因素綜合影響。各因素作用主次順序為A>C>B>D。由表4可知，燉煮時間、陳皮添加量、山楂添加量和玫瑰茄添加量均對CPB-THR感官品質存在極顯著影響(P<0.001)。最優(yōu)配方組合為AzB,CgD2，即燉煮時間為30min，陳皮添加量為2.0%，山楂添加量為1.4%，玫瑰茄添加量為0.6%。最佳組合A2B,CaD2未出現(xiàn)在正交試驗中，需要進行驗證試驗。驗證最佳組合A2B,CaD,所得感官評分為82.30，大于正交試驗最高得分80.20，表明正交試驗優(yōu)化所得結果具有可靠性。

三、結論

通過單因素試驗結合正交優(yōu)化試驗，得到CPB-THR的最佳工藝參數為燉煮時間30 min，陳皮添加量2.0%，山楂添加量1.4%，玫瑰茄添加量0.6%。此條件下復合梨湯飲料的總酚含量為94.75 mg/L，總黃酮為含量112.5 mg/L.DPPH自由基清除率為89.5%，羥基自由基清除率為76.4%，鐵離子還原能力為0.82。
 

通過中藥系統(tǒng)藥理學分析平臺(TCMSP)，從CPB-THR中篩選得到592個有效活性成分，并獲取了這些成分對應的蛋白靶點信息。同時，通過Gene Cards數據庫篩選出FD相關的靶點基因，經在線韋恩圖平臺分析，選出了310個藥物與疾病的交集靶點。進一步的核心靶點分析表明，類固醇受體輔激活因子(SRC)、蛋白激酶Ba(AKT1)、磷脂酰肌醇3·激酶(PIK3R1)、絲裂原活化蛋白激酶激酶1(RAF1)、表皮生長因子受體(EGFR)等在CPB-THR干預FD的過程中發(fā)揮著關鍵作用，是其發(fā)揮藥效的核心靶點。KEGG通路富集分析結果顯示，PI3K·Akt通路、脂質與動脈粥樣硬化通路、AGE·RAGE信號通路等是CPB-THR發(fā)揮作用的主要信號通路;結合GO功能富集分析結果，可推測該復合梨湯飲料可能通過協(xié)同調控上述核心靶點及信號通路，實現(xiàn)促進胃腸動力、改善胃腸道屏障功能及調節(jié)腸道微環(huán)境等多種生物學效應，進而達到對FD的輔助調理作用。

本研究借助網絡藥理學的技術與方法展開探究，雖存在一定局限性，但從藥物成分靶標與疾病靶標的關聯(lián)切入，初步預測了CPBTHR治療功能性消化不良(FD)的關鍵作用蛋白，探討了其在治療FD中的潛在作用機制，為后續(xù)運用分子生物學手段開展驗證提供參考。