1）膜的處理：戴上干凈手套，取出硝酸纖維膜，按需要剪成一定大小，量好各樣點間距離，用軟鉛筆標記。
　　2）DNA變性：將DNA溶液于1×TE（pH8.0）緩沖液中或蒸餾水中，取一定量DNA樣品加于小塑料管中，在100℃沸水中煮10min，迅速入冰水中。
　　3）點樣：用塑料或硅化玻璃或微量加樣器取1～5μl變性DNA，將滴管放在硝酸纖維膜上，使DNA慢慢吸在濾膜上，點樣完后涼干。
　　4）固定：將涼干的濾膜夾在濾紙中，于80℃干烤2～3h，然后進行雜交。